患者，男，66岁，农人，因“连续头痛1月，加剧2天”于2021年3月9日入院。
该患者1月前患者无显着诱因呈现头痛，伴有厌恶未吐，无发热伤风，无视物含糊，无四肢肢体抽搐无力，无咳嗽、咳痰，无腹痛、腹泻等不适，于当地医院住院予“抗病毒、止痛”等对症医治，患者头痛有所好转。
入院前一天患者头痛再次发生，为求进一步诊治，门诊以“头痛待查”收住我院。有高血压病史，否定糖尿病、结核、癫痫病史，否定手术外伤史，否定药敏史。
入院查体显现：T 36.4℃，P72次/分，R19次/分，BP177/98mHg，神志清楚，双侧瞳孔等大等圆，对光反射活络，四肢肌力肌张力正常，腱反射对称存在，双侧针刺觉对称，双下肢病理反射征未引出。
颈项强直4横指，克氏征阳性。脑印象学查看：脑MR平扫+增强提示双侧小脑半球多发软脑膜反常强化灶，开始确诊脑膜炎。
入院当天试验室查看成果示：中性粒细胞数：6.36×109/L↑,中性粒细胞百分率：90.6%↑，淋巴细胞数：0.4×109/L↓，降钙素原：0.1ng/mL，CA72-4：9.78U/mL↑，FERRITI：435.85ng/mL↑，凝血功用及惯例输血全套成果均无反常。
入院第二天因患者病况需求，在征得患者及家族赞同后，管床医生为患者行腰穿获取无色弄清通明脑压为330毫米水柱↑的脑脊液。
开始剖析：该患者存在头疼症状且脑膜影响症呈阳性反应，结合其印象学体现，临床开始确诊为脑膜炎。那么，该患者是感染性还对错感染性脑膜炎呢？
1.脑血管意外：该病亦可呈现四肢抽搐、认识损失等症状，但该病多既往有心脑血管及糖尿病等根底疾病，且该患者无外伤史，暂不考虑；
2.蛛网膜下腔出血：可呈现剧烈头痛，但该患者脑脊液无色弄清通明，而蛛网膜下腔出血后脑脊液黄色或赤色加以辨别，且门诊材料显现该患者头MR未见出血，综上所述该患者感染性脑膜炎可能性较大；而感染性脑膜炎常由细菌、病毒、真菌和寄生虫等所造成的。咱们进一步剖析该患者脑脊液相关查看如下图所示。
依据《临床查验根底》[1]教材中对常见脑膜疾病的脑脊液查验辨别见表1，结合该患者脑脊液查验成果（图1至图3）咱们归纳剖析：
首要该患者脑脊液理学查看成果为无色通明且无凝块，开始扫除化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、脑出血、蛛网膜下腔出血等脑膜疾病；
其次患者脑脊液氯化物下降，脑脊液蛋白增多，脑脊液葡萄糖正常且结合细胞学查看发现细胞总数增多以淋巴细胞显着添加为主，中性粒细胞仅占约3%，咱们进一步扫除病毒性脑膜炎、流行性乙脑、脑肿瘤脑脓肿、神经性梅毒。
此刻，咱们高度置疑该患者存在隐球菌性脑膜炎的可能性较大。随即联络该患者的主治医生开隐球菌相关检测项目。
隐球菌性脑膜是由隐球菌感染脑膜或脑本质引起的中枢神经系统感染性疾病，是中枢神经系统最常见的时机性真菌感染，好发于细胞免疫功用低下者，如AIDS、恶性肿瘤、糖尿病、及大剂量运用糖皮质激素者[2]。
近年来，因为广谱抗菌药物、糖皮质激素、化疗药物、免疫抑制药物的广泛使用及免疫缺点性疾病和的添加，隐球菌性脑膜炎增长率大幅上升，明显高于病毒性脑膜炎和结核性脑膜炎[3]。
隐球菌是酵母类真菌，广泛存在于自然界中,也可存在于人体皮肤,口腔及肠道中。引起人类感染的隐球菌首要是新式隐球菌和格特隐球菌，新式隐球菌和格特隐球菌常统称为新式/格特隐球菌复合（Cryptococcus gattii/neoformans species complexes）。
因为隐球菌性脑膜炎临床体现及印象学查看多无特异性，其确诊首要依赖于试验室查看。常用的试验室确诊办法包含脑脊液显微镜下直接检测、真菌培育、荚膜抗原检测及分子生物学检测[4]。
微生物学组收到脑脊液标本。外观：无色通明。首要将脑脊液标本离心处理后搜集沉积，并进行墨汁染色后进行镜下检测。印度墨汁涂片直接镜检：可见圆形或卵圆形的有折光性菌体，其周围有一圈透亮的厚荚膜，内有反光孢子，根本确定为隐球菌。见图4。与此同时，用该患者血清加做荚膜抗原检测，成果该患者血清荚膜抗原为阳性。见图5。
随后咱们为了进一步判定，咱们将脑脊液标本接种在沙氏培育基上，使用病原性隐球菌在25℃和37℃孵育均可成长，而非病原性隐球菌在37℃时不成长特性[2]。咱们将接种好的培育基放入37℃培育箱里，48h后调查菌落是否成长。
经过37℃48h培育，沙氏平板上可见成长茂盛、呈奶油色、蜡样润滑，粘稠的酵母样菌落[3]，见图6。
这儿咱们为了大大缩短判定时刻及能很好地区别隐球菌不同血清型和分子型，咱们用基质辅佐激光解析电离飞翔时刻质谱（MALDI-TOFMS）进行判定。终究成果为新式隐球菌格鲁比变种（血清型A型，Cryptococcusneoformans varietyGrubii)，分值1.986分。成果及峰图别离见图7和图8。
参照酵母菌肉汤稀释法药敏试验规范用根据微量肉汤稀释法ATBFungus 真菌药敏试条进行药敏试验成果如下：5-氟胞嘧啶（5-FC）、氟康唑(FCA)、两性霉素B(AMB) 均灵敏。
新式隐球菌广泛散布于自然界，以出芽的办法生殖，免疫低下的人群更易被感染。医治时刻长，其致死率、致残率较高，因而前期、精准确诊显得尤为重要。
前期首要依托临床医生的高度警觉，置疑呈现脑病时应及时行脑脊液查看，现在试验室能够经过传统病原学检测手法包含墨汁染色、真菌培育、荚膜抗原检测以及分子生物学办法包含PCR、质谱剖析法、宏基因组下一代测序等技能，联合使用可进步隐球菌的检出率。
作为查验工作者的咱们除应具有专业技能，还应该多多自动与临床交流，以及时找到病因使患者得到有用的医治。
[1]刘成玉,罗春丽.临床查验根底.第5版[M].公民卫生出版社,2012.
[2]倪语星,尚红.临床微生物学查验.第5版[M].公民卫生出版社,2013.
[3]王建中. 临床查验确诊学图谱[M]. 公民卫生出版社, 2012.
[4]邢小微,张家堂. 隐球菌性脑膜炎的确诊发展[J].我国线]李艳冰, 鲁炳怀. 隐球菌病的试验室检测与临床研究发展[J]. 华西医学, 2020(8):894-900.
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